|
|
Jel mi možete reći što bi bio unutarnji standard. Naime, on se koristi kod određivanja tiamina pri čemu se on prevodi u tiokrom pa se onda određuje fluorescencija. Definicija kaže da u unutarnjem standardu imamo poznatu količinu tiokroma. Ali ne razumijem. Jel ste sr sreli negdje s tim pojmom???'
|
Ime i prezime:
Katarina Kasa
kkasa@inet.hr
|
|
|
Pretpostavimo da želiš izmjeriti količinu tiamina u nekom uzorku. Taj uzorak ćeš najprije kemijski obraditi (sa sumpornom kiselinom i zatim s fosfatazom) tako da oslobodiš dio tiamina koji je kovalentno vezan u estere ili na proteine. Zatim ćeš tiamin odijeliti adsorpcijom, oksidirat ćeš ga npr. lužnatom otopinom kalijeva heksacijanoferata(III) pri ćemu će iz tiamina nastati tiokrom. Nastali tiokrom ekstrahirat ćeš izobutilnim alkoholom i izmjeriti fluorescenciju otopine. (To je samo princip, neke stvari se možda mogu raditi i drugačije...) E sada se postavlja pitanje: u kakvoj je vezi izmjerena fluorescencija ispitivane otopine s koncentracijom tiokroma u njoj? Za to ti može poslužiti standardna otopina tiokroma točno poznate koncentracije. Uspoređujući fluorescenciju mjerenog uzorka s fluorescencijom standardne otopine poznate koncentracije, izračunat ćeš koncentraciju tiokroma u ispitivanoj otopini.
Po mom mišljenju, unutarnji standard bi značilo da ti u svoju ispitivanu otopinu dodaš još i poznatu količinu tiokroma i zatim mjeriš razliku u fluorescenciji između tako pripravljene otopine i standardne otopine tiokroma.
S obzirom da očito opisuješ neku vježbu koju ste radili, bilo bi najbolje da zamoliš onoga tko vodi tu vježbu da ti točno objasni ono što ne razumiješ. Pozdrav, |
|
Odgovorio:
Tomislav Portada
tportad@irb.hr
<-- Povratak
|
|
|
U međuvremenu sam se interesirao i dobio dodatna objašnjenja o mjerenju koncentracije pomoću fluorescencije. Takvo mjerenje može dati vrlo točne i precizne podatke, no samo ako se čovjek drži određenih pravila koja se temelje na teoriji fluorescencije. S druge strane, nepoznavanje teorijskih postavki može čovjeka navesti na sasvim krive zaključke.
Ako želiš saznati više o tome, javi se na moju e-mail-adresu. Mogu te upoznati sa svojim kolegama na Institutu Ruđer Bošković koji se bave fluorescencijom. Njih možeš pitati sve što te zanima. Pozdrav, |
|
Odgovorio:
Tomislav Portada
tportad@irb.hr
<-- Povratak
|
|
|
Postavite
pitanje iz bilo kojeg područja kemije i
e-škola će osigurati da dobijete odgovor od kompetentnog znanstvenika. |
|
|